上海金畔生物科技有限公司提供锡纸碗,国产,货号Y150 125个/包,可以访问官网了解更多产品信息。
锡纸碗,国产,货号Y150 125个/包
标签归档:货号
Cell Meter VX500固定化细胞活性染料 货号22542-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
Cell Meter VX500固定化细胞活性染料
简要概述
产品基本信息
货号:22542
产品名称:Cell Meter VX500固定化细胞活性染料
规格:200 Tests
储存条件:保存在冰箱-15℃干燥
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:N/A
激发波长(nm):433
发射波长(nm):498
产品介绍
从活细胞中区分和排除死细胞可以更清晰地分离和鉴定细胞群。Cell Meter VX500固定化细胞活性染料是一类细胞不可渗透的荧光活性染料,它们经过优化以匹配常见流式细胞仪的主要激发激光,例如350、405、488、633和647 nm。这些染料不渗入活细胞,但渗入膜受损的细胞。它们与含胺和硫醇的蛋白质以及其他细胞成分发生不可逆的反应。由于具有受损膜的死细胞或固定细胞更容易与Cell Meter VX500固定化细胞活性染料发生反应,因此比具有完整膜的活细胞的染色更亮,因此这些染料可用于评估哺乳动物细胞的活与死状态。使用这些染料时,需要考虑一些因素,例如,每种染料的滴定,以确保活细胞几乎没有染色。Cell Meter VX500固定化细胞活性染料经过优化,可以在405 nm的紫色激光激发下以500 nm的波长发射。与其他商业上类似的活性染料相比,这种固定化细胞活性染料更加耐用、稳定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter VX500固定化细胞活性染料。
点击查看光谱
图示
![]() 图1.通过Cell Meter 固定化活性染料检测Jurkat细胞活性。处理Jurkat细胞并用Cell Meter VX500(Cat#22542)染色,然后固定在3.7%甲醛中,并通过流式细胞仪进行分析。死细胞群体(蓝色峰)与带有太平洋橙色通道的活细胞群体(红色峰)很容易区分开,在固定之前和之后获得几乎相同 |
iFluor 633羊抗兔免疫球蛋白(H+L) 货号16638-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
iFluor 633羊抗兔免疫球蛋白(H+L)
货号 | 16638 | 存储条件 | F/L |
规格 | 200 ug | 价格 | 984 |
Ex (nm) | 638 | Em (nm) | 655 |
分子量 | 溶剂 | Water | |
产品详细介绍 |
简要概述
产品基本信息
货号:16638
产品名称:iFluor 633羊抗兔免疫球蛋白(H+L)
规格:200 ug
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:24个月
产品物理化学光谱特性
分子量:N/A
溶剂:水
激发波长(nm):638
发射波长(nm):655
产品介绍
iFluor 633羊抗兔免疫球蛋白(H+L)是美国AAT Bioquest生产的荧光标记二抗,AAT Bioquest的iFluor 染料针对标记蛋白质(特别是抗体)进行了优化。这些染料是明亮的,光稳定的,并且对蛋白质的淬灭作用 小。它们可以被荧光仪器的主要激光线(例如350、405、488、555和633 nm)很好地激发。iFluor 633山羊抗兔IgG(H + L)偶联物的荧光激发和发射 值分别为〜638 nm和〜655 nm。这些光谱特性使其成为AlexaFluor®633山羊抗兔IgG(H + L)偶联物(AlexaFluor®是Invitrogen的商标)的替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 633羊抗兔免疫球蛋白(H+L)
EDANS C5马来酰亚胺 货号619-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
EDANS C5马来酰亚胺
简要概述
产品基本信息
货号:214
产品名称:6-NED琥珀酰亚胺酯
规格:1 mg
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:417.44
外观:固体
溶剂:DMSO
Ex(nm):336
Em(nm):455
产品介绍
EDANS是开发基于FRET的核酸探针(例如分子信标)和蛋白酶底物的受欢迎的供体者之一。在基于FRET的探针中,EDANS通常与DABCYL或DABSYL配对。它的荧光对环境敏感。EDANS C5马来酰亚胺是硫醇反应性的EDANS衍生物。它是水溶性的,并且具有与EDANS相同的光谱特性。
细胞膜荧光探针BSB 货号23050-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
卵清蛋白(六亚甲基二胺修饰)cOVA 适合大免疫反应 货号5606-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
卵清蛋白hOVA 适合 免疫反应
简要概述
产品基本信息
货号:5606
产品名称:卵清蛋白hOVA 适合 免疫反应
规格:10mg
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:60000
溶剂:
激发波长(nm):N/A
发射波长(nm):N/A
产品介绍
hOVA是用六亚甲基二胺修饰的卵清蛋白(OVA),使蛋白质具有更多的胺基团(因此在中性pH下具有更多的正电荷)。 它被证明是用于开发抗体的优异载体蛋白,因为hOVA缀合物比未经修饰的OVA cinjugates具有更强的免疫反应。 金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的卵清蛋白(六亚甲基二胺修饰)cOVA 适合大免疫反应。
钙离子荧光探针Rhod-2, AM 货号21060-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
简要概述
钙离子荧光探针Rhod-2, AM是美国AAT Bioquest研发的用于钙通量测定的试剂,钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体(GPCR)的 发现中的优选方法。 我们的Fluo-8®和Rhod-4™系列钙检测试剂是 亮的绿色和红色钙指示剂,而我们的Cal-520®和Cal-590™具有 高的细胞内钙检测信号/背景比,因为它们具有出色的保留 活细胞。 AAT Bioquest以 高质量提供其他钙指标,如Fluo-4,Fluo-3,Fura-2,Indo-1,Rhod-5N和Rhod-2 AM,金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供优质的钙离子荧光探针。
点击查看光谱
点击查看实验方案
产品说明书
操作步骤
1.使用钙指示剂AM Esters加载细胞:
AM酯是非极性酯,其易于穿过活细胞膜,并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。 但是,使用AM酯时必须小心,因为它们易于水解,特别是在溶液中。 它们应该用高质量的无水二甲基亚砜(DMSO)重新配制。 DMSO储备溶液应在-20°C下干燥储存并避光。 在这些条件下,AM酯应稳定数月。
以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该方案仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。
a)在高质量无水DMSO中制备2至5 mM AM酯原液。
b)在实验当天,将钙指示剂溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。使用0.02%Pluronic®F-127在您选择的缓冲液(如Hanks和Hepes缓冲液)中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系,我们建议钙指示剂的 终浓度为4-5 uM。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。为避免因过载和潜在染料毒性引起的任何伪影,建议使用可产生足够信号强度的 小探针浓度。
c)如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白,可以在细胞培养基中加入丙磺舒(1-2.5 mM)或磺吡酮(0.1-0.25 mM),以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37°C下用钙指示剂酯孵育细胞20分钟至1小时。
d)在HHBS或您选择的缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂,如2.5mM丙磺舒,如果适用)中洗涤细胞1-2次以除去过量的探针。
e)在所需的Ex / Em波长下进行实验。
2.测量细胞内钙响应:
为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd,使用等式:[Ca]free = Kd[F – Fmin]/Fmax – F]
其中F是实验钙水平下指示剂的荧光,Fmin是不存在钙时的荧光,Fmax是钙饱和探针的荧光。 解离常数(Kd)是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比,荧光指示剂的Ca2 +结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显著。 细胞内指标的原位校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca 2+缓冲液来进行原位校准。 或者,细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2 +水平。 说明书中的表1列出了一些钙试剂的Kd值供您参考。
BXQ 1马来酰亚胺 货号2404-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
BXQ-1马来酰亚胺
简要概述
产品基本信息
货号:2404
产品名称:BXQ-1马来酰亚胺
规格:1mg
储存条件:保存在冰箱-15℃干燥
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:626.67
溶剂:DMSO
吸收(nm):522
产品介绍
Black Hole Quencher 染料(BHQ®)是非荧光染料,主要用于制备FRET寡核苷酸(Black Hole Quencher 和BHQ®是Biosearch的商标)。它们几乎是无荧光的,具有中等的消光系数。这些暗猝灭剂 常用于分子信标探针,其中FRET对它们的荧光猝灭贡献 小,因此,对供体-受体光谱重叠的依赖性与其他FRET探针(如FRET肽)无关。BHQ染料可以淬灭各种荧光团,特别是荧光素衍生物,例如FAM,HEX,TET,NED和JOE。这可能反映出BHQ与荧光团形成稳定的非荧光络合物的能力。BXQ-1在化学上等同于BHQ-1。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的BXQ-1马来酰亚胺。
Cy5 NHS酯,钾盐 货号280-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
Cy5 NHS酯,钾盐
简要概述
产品基本信息
货号:280
产品名称:Cy5,NHS酯,钾盐
规格:1mg
储存条件:-15℃干燥
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:791.97
外观:蓝色固体
溶剂:DMSO
激发波长(nm):649
发射波长(nm):665
产品介绍
Cy5 NHS酯,钾盐是美国AAT Bioquest生产的Cy系列染料,这种Cy5®染料与GE的单反应性Cy5®NHS酯相同。它容易与氨基反应。我们的Cy5®Fluor经过全面QC测试,可确保高水平的发色团和活性染料含量。单活性染料适用于蛋白质和寡核苷酸的靶向,精确标记,双活性染料更适合于一般标记。建议使用NHS酯染料标记胺基,建议使用马来酰亚胺染料标记硫醇基团。各种花青5(Cy5®)染料已用于标记生物分子,用于荧光成像和其他基于荧光的生化分析。它们广泛用于标记肽,蛋白质和寡核苷酸等.Cy5®染料是 常见的红色荧光团中的一种。这些多功能荧光团可以耐受3-10的pH范围,用于生物相关pH的各种应用。该染料还具有DMSO耐受性和光稳定性,能够在不损失性能的情况下从储存转移至分析。水溶性消除了在分析缓冲液中对有机溶剂的需要。 Cy5®是GE Healthcare的商标。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cy5 NHS酯,钾盐。
胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA 货号13422-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA
简要概述
胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,一种含有苄氧羰酰基(Z)的Caspase 3显色底物,一种蛋白酶,当细胞暴露在细胞凋亡的条件下时具有快速催化活性;会切断多聚(ADP-ribose)聚合酶。这种七-氨基-4氟甲基香豆素衍生物比七-氨基-4甲基香豆素衍生物具有更好的膜渗透性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA。
产品说明书
样品实验方案
以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。
1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定
1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。
1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:
50 L基质原液
100L DTT(1M)
400L EDTA(100 mM)
10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4
1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。
1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。
2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针
2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。
2.2根据需要对细胞进行处理。
2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。
2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。
2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。
2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)
3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。
3.2根据需要对细胞进行处理。
3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。
3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。
3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
6-HEX炔烃 货号241-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
6-HEX炔烃
货号 | 241 | 存储条件 | f/l |
规格 | 5 mg | ||
Ex (nm) | 533 | Em (nm) | 559 |
分子量 | 620.05 | 溶剂 | DMSO |
产品详细介绍 |
简要概述
产品基本信息
货号:241
产品名称:6-HEX炔烃
规格:5mg
储存条件:-15℃干燥
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:620.05
溶剂:DMSO
激发波长(nm):533
发射波长(nm):550
产品介绍
6-HEX炔烃是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,6-HEX广泛用于核酸测序和相关研究。 6-HEX炔烃通过众所周知的点击化学提供了标记叠氮化物修饰的寡核苷酸的便利方法。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的6-HEX炔烃。
钙离子荧光探针Fluo-8FF,钾盐 货号21102-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
钙离子荧光探针Fluo-8FF,钾盐
简要概述
钙离子荧光探针Fluo-8FF,钾盐是美国AAT Bioquest生产的用于钙通量测定的试剂,钙测量对于许多生物学研究至关重要。在结合Ca2+后显示光谱响应的荧光探针使研究人员能够使用荧光显微镜,流式细胞仪,荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离Ca2+浓度的变化。在可见光激发钙指示剂中,Fluo-3和Fluo-4 常用。但是,Fluo-3 AM和Fluo-4 AM在酯酶水解后在活细胞中仅适度发荧光,并且需要苛刻的细胞加载条件才能 化其细胞钙反应。开发Fluo-8®染料可改善细胞负载和钙响应,同时保持便捷的Fluo-3和Fluo-4光谱波长(在〜490 nm处具有 激发和在〜520 nm处具有 发射)。Fluo-8®AM仅需要室温,而Fluo-3 AM和Fluo-4 AM需要37℃的电池负载。此外,Fluo-8®的亮度是Fluo-4 AM的2倍,是Fluo-3 AM的4倍。AAT Bioquest提供了一套出色的Fluo-8®试剂,具有不同的钙结合亲和力(Fluo-8®:Kd = 389 nM; Fluo-8H:Kd = 232 nM; Fluo-8L:Kd = 1.86 µM; Fluo-8FF :Kd = 10 µM)。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供优质的钙离子荧光探针Fluo-8FF,钾盐。
点击查看光谱
产品说明书
操作步骤
1.使用钙指示剂AM Esters加载细胞:
AM酯是非极性酯,其易于穿过活细胞膜,并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。 但是,使用AM酯时必须小心,因为它们易于水解,特别是在溶液中。 它们应在使用前用高质量的无水二甲基亚砜(DMSO)重新配制。 DMSO储备溶液应在-20°C下干燥储存并避光。 在这些条件下,AM酯应稳定数月。
以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。该方案仅提供指南,实际情况应根据您的具体需求进行修改。
a)在高质量无水DMSO中制备2至5 mM AM酯原液。
b)在实验当天,将钙指示剂溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。使用0.02%Pluronic®F-127在您选择的缓冲液(如Hanks和Hepes缓冲液)中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系,我们建议钙指示剂的 终浓度为4-5 uM。 细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。 为避免因过载和潜在染料毒性引起的任何伪影,建议使用可产生足够信号强度的 小探针浓度。
注意:非离子洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加钙指示剂AM酯的水溶性。
c)如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白,可以在细胞培养基中加入丙磺舒(1-2.5 mM)或磺吡酮(0.1-0.25 mM),以减少脱酯化指标的泄漏。 在室温或37°C下用钙指示剂酯孵育细胞20分钟至1小时。
d)在HHBS或您选择的缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂,如2.5mM丙磺舒,如果适用)中洗涤细胞1-2次以除去过量的探针。
e)在所需的Ex / Em波长下进行实验(见说明书中的表1)。
2.测量细胞内钙响应:
为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd,使用以下等式:[Ca]free = Kd[F – Fmin]/Fmax – F]
其中F是实验钙水平下指示剂的荧光,Fmin是不存在钙时的荧光,Fmax是钙饱和探针的荧光。 解离常数(Kd)是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比,荧光指示剂的Ca2 +结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca 2+缓冲液来进行原位校准。 或者,细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2 +水平。 说明书中的表1列出了一些钙试剂的Kd值供您参考。
NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法)
简要概述
Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒 (比色法)是美国AAT Bioquest研发的检测NADP/NADPH的试剂盒,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)和NADP是细胞中发现的两种重要的辅酶。 NADH(NADPH)是NAD(NADP)的还原形式,NAD(NADP)是NADH(NADPH)的氧化形式。 NAD或NADP在氧化还原反应中起辅助因子的作用,在细胞反应中转移电子。 氧化形式和还原形式之间的平衡是NAD / NADH(NADP / NADPH)比率。 该比率是指示细胞氧化还原状态的重要组分,并且它是反映代谢活性和细胞健康的测量。 在健康的哺乳动物组织中,游离NAD和NADH之间的比率的估计可以高达700。相反,NADP / NADPH比率通常为约0.005,因此NADPH是该辅酶的主要形式。
该Amplite 比色NADP / NADPH比率分析试剂盒提供了一种比色法,用于测量培养细胞中细胞内总NADP / NADPH量和NADP / NADPH比率。 在该测定中,裂解物中的NADPH可以用NADPH提取溶液提取,然后通过NADPH探针识别,在反应后得到黄色染料,其在460nm处具有吸光度。 产生的染料量与细胞裂解物中NADP或NADPH的浓度成正比,可用作细胞NADP / NADPH浓度的指示剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的NADP/NADPH检测试剂盒。
产品说明书
96孔板检测示例
概述
准备25μLNADPH标准品和/或测试样品
加入25μLNADPH提取液
在室温下孵育15分钟
加入25μL中和溶液
加入75μLNADPP/ NADPH反应混合物在室温下孵育15分钟至2小时监测 在460nm处的吸光度
注意:在开始实验之前,在室温下解冻每个试剂盒组分中的一个。
操作步骤
1.准备NADPH原液:
将200μLPBS缓冲液加入到NADPH标准品(组分C)的小瓶中,得到1mM(1nmol / L)NADPH储备溶液。
注意:未使用的NADPH原液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。
2.制备NADP / NADPH反应混合物:
2.1将8mL NADPH探针缓冲液(组分B-II)加入到NADP / NADPH回收酶混合物(组分A)的瓶中,并充分混合。
2.2将2 mL NADPH探针(组分B-I)加入上述瓶中(来自步骤2.1)并充分混合。
注意:这种NADP / NADPH反应混合物足以进行125~200次分析。 未使用的NADP / NADPH反应混合物应分成一次性等分试样并储存在-20℃。
3.准备连续稀释的NADPH标准品(0至2μM):
3.1将2L 1mM NADPH储备溶液(来自步骤1)加入998L PBS缓冲液(pH7.4)中,产生2M(2 pmols / L)NADPH标准溶液。
注意:稀释的NADPH标准溶液不稳定,应在4小时内使用。
3.2取200μL2MNADPH标准溶液(来自步骤3.1)进行1:2连续稀释,得到1,0.5,0.25,0.125,0.0625,0.0313和0M系列稀释的NADPH标准品。
4.运行总NADP / NADPH分析(总共400个分析/试剂盒):
4.1如说明书中的表1和2中所述,将NADPH标准品和含有NADP / NADPH的测试样品的系列稀释液加入白色/透明底96孔微孔板中。
注意:根据需要准备细胞或组织样本。 为方便起见,裂解缓冲液(组分G)可用于裂解细胞。 (详见附录)。
4.2将50μL的NADP / NADPH反应混合物(来自步骤2.2)加入NADPH标准品,空白对照和测试样品(来自步骤4.1)的每个孔中,以使总NADP / NADPH测定体积为100μL/孔。
4.3在室温下孵育反应15分钟至2小时,避光。
4.4使用吸光度读板仪在460 nm处检测吸光度的增加。
5.运行NADP / NADPH比率分析(总共250个分析/试剂盒):
5.1如说明书中的表3和4中所述,将连续稀释的NADPH标准品和/或含NADP / NADPH的测试样品加入白色/透明96孔微量培养板中。
注意:根据需要准备细胞或组织样本。 为方便起见,裂解缓冲液(组分G)可用于裂解细胞。
5.2对于NADPH提取(NADPH量):将25μLNADPH提取溶液(组分D)加入含有NADP / NADPH的测试样品的孔中。在室温下孵育10至15分钟,然后加入25μL中和溶液(组分E)以中和NADPH提取物,如说明书中的表3和4中所述。
对于总NADP和NADPH(总量):将25μLNADPP/ NADPH对照溶液(组分F)加入NADPH标准品的孔和含有NADP / NADPH的测试样品中。在室温下孵育10至15分钟,然后如说明书中的表3和4中所述添加25μL提取对照溶液(组分F)。
注意:根据需要准备细胞或组织样本。为方便起见,裂解缓冲液(组分G)可用于裂解细胞(详见附录)。
5.3将75μL的NADP / NADPH反应混合物(来自步骤2.2)加入NADPH标准品,空白对照和测试样品(NADP / NADPH)的每个孔中,并测试样品(NADPH提取物)(来自步骤5.1)以使总量达到测定体积为150μL/孔。
5.4在室温下孵育反应15分钟至2小时,避光。
5.5使用吸光度读板仪在460 nm处检测吸光度的增加。
数据分析
空白孔中的吸光度(仅PBS缓冲液)用作对照,并从具有NADPH反应的那些孔的值中减去。
图1. Amplite™比色NADP / NADPH比率分析试剂盒用于使用SpectraMax酶标仪(Molecular devices)测量白色/透明96孔微量培养板中的总NADP / NADPH量和NADP / NADPH比率。
A-总NADPH和NADP剂量反应:孵育1小时可检测到低至0.03μM的总NADPH。
B-NADP / NADPH比例:用或不用NADP提取溶液处理等量的NADP和NADPH混合物15分钟,然后在室温下用提取溶液中和。 在460nm读取信号。 NADP / NADPH摩尔比基于图1B中所示的吸光度计算。
附录:使用组分G(NAD / NADH裂解缓冲液)的测试样品制剂
1.植物细胞样品:
用裂解缓冲液以200mg / mL均化,并以2500rpm离心5-10分钟,使用上清液进行测试。
2.细菌样品:
离心收集细菌细胞((10,000 g,0°C,15 min)。使用约1亿至1千万细胞/ mL裂解缓冲液,将处理后的溶液在室温下保持15分钟。以2500 rpm离心5分钟, 用上清液进行试验。
3.哺乳动物细胞样本:
从平板孔中取出培养基,每1-5百万个细胞使用约100μL裂解缓冲液(或在96孔细胞培养板中使用50-100μL/孔),并将处理过的溶液在室温下保持15分钟。 直接使用细胞裂解液或以1500 rpm离心5分钟,使用上清液进行测试。
4.组织样品:
称取约20mg组织,用冷PBS洗涤。 在微量离心管中用400μl裂解缓冲液均化。 以2500rpm离心5-10分钟,使用上清液进行测定。
6羧基四甲基罗丹明货号359-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
6-羧基四甲基罗丹明 6-TAMRA ethylenediamine
产品基本信息
简要概述
货号:359
产品名称:6-羧基四甲基罗丹明
规格:5mg
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:700.58
溶剂:DMSO
激发波长(nm):544
发射波长(nm):575
产品介绍
6-羧基四甲基罗丹明是美国AAT Bioquest生产的罗丹明染料。6-羧基四甲基罗丹明是产生TAMRA生物偶联物的基础,TAMRA是使用的多种生物偶联物种受欢迎的具有明亮橙色荧光的生物共轭物之一。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的6-羧基四甲基罗丹明。
Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 绿色荧光 货号22601-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 绿色荧光
简要概述
Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒是美国AAT Bioquest生产的染色细胞的试剂盒,我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具,用于对细胞功能进行荧光显微镜检查。 细胞的有效标记为研究时空背景下的细胞事件提供了一种有力的方法。 该特定试剂盒设计用于以蓝色荧光均匀标记固定的哺乳动物细胞,以进行长期的显微镜检查。 该试剂盒使用了专有的蓝色荧光染料,该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料具有很好的光稳定性,因此可以重复检查图像。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的工具,也可用于荧光显微镜。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒。
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.用HHBS制备样品(0.5 mL /分析)
2.替换为HHBS
3.将Stain It 添加到细胞悬浮液中
4.在室温或37°C下染色细胞20-60分钟
5.洗净细胞
6.固定细胞(可选)
7.使用适当的激发/发射滤光片,用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品
显微镜封固液 ReadiUse 货号20009-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
显微镜封固液 ReadiUse
简要概述
固定介质是通常在盖玻片下嵌入样品的溶液。像水或甘油这样的简单液体也可以被视为固定介质。好的固定介质的特性包括:与样品无反应性,随时间变化而不会结晶,变暗或改变折射率的稳定性,在样品所制备的介质中的溶解度,以及不会导致样品污渍褪色或浸出的特性。我们所有的ReadiUse 试剂都需要 少的动手时间。
产品说明书
操作步骤
1.预热安装溶液:从冰箱中取出安装溶液。 将小瓶加热至室温,避光。
2.施加安装溶液:清除样品中多余的液体。 向样品中加入一滴固定溶液。 如果样品在载玻片或组织培养皿上,请小心地将盖玻片放在液滴上,以免产生气泡。 如果样品在盖玻片上,请将盖玻片倒在干净的玻璃载玻片上。 去除多余的防褪色成分。
3.准备用于成像的样品:固定溶液应孵育2小时至过夜。 要长期保存,请用指甲油或塑料密封剂将盖玻片密封在玻片上。 已安装的载玻片应在黑暗中于4ºC存放,以实现的样品寿命。 荧光成像将保持稳定数周。 样品可以在安装后立即成像。
Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒 货号13840-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒
货号 | 13840 | 存储条件 | f/l |
规格 | 200 Tests | ||
Ex (nm) | 575 | Em (nm) | |
分子量 | 溶剂 | ||
产品详细介绍 |
简要概述
Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测草酰乙酸的试剂盒,草酰乙酸是柠檬酸循环的重要组成部分,它与乙酰辅酶A反应生成柠檬酸盐。它还涉及糖异生,尿素循环,乙醛酸循环,氨基酸合成和脂肪酸合成。草酰乙酸的缺乏限制了糖原异生和尿素循环功能,并且可以导致能量产生减少。草酰乙酸也可用作血液谷氨酸清除剂,在创伤性脑损伤后提供神经保护,表现为海马神经元损失减少和神经功能改善。Amplite 比色草酰乙酸检测试剂盒提供了一种灵敏的检测方法,用于定量生物样品中的草酰乙酸。。用吸光度酶标仪在575nm处用Amplite Red监测过氧化氢的产生。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 比色法草酰乙酸检测试剂盒。
产品说明书
96孔板测定示例
概述
准备测试样品(50μL)和连续稀释的草酰乙酸标准品(50μL)
加入等体积的测定混合物(50μL)
在室温下孵育30分钟至1小时
监测575nm处的吸光度强度
注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。
操作方法
1.准备连续稀释的草酰乙酸标准品和测试样品:
1.1将100μLDdH2O加入到草酰乙酸盐标准小瓶(组分E)中以制备100mM草酰乙酸标准溶液。
1.2制备草酰乙酸标准稀释液:将10μL100mM草酰乙酸盐(来自步骤1.1)加入990μL测定缓冲液(组分C)中,得到1mM草酰乙酸溶液。 将320μL的1mM草酰乙酸标准溶液加入680μL测定缓冲液中以制备320μM草酰乙酸溶液。 进行1:2连续稀释,得到160,80,40,20,10,5μM连续稀释的草酰乙酸标准品。
1.3根据说明书中的表1,将50μL含草酰乙酸的样品和连续稀释的草酰乙酸标准品加入透明底96孔微量培养板中。
2.准备草酰乙酸测定混合物:
2.1Make Amplite 红色底物原液(200X):将50μLDMSO(组分F)加入Amplite Red底物(组分A)中,制成200X Amplite Red底物原液。
2.2制备草酰乙酸脱羧酶(OAC)储备溶液(100X):将50μLddH2O加入草酰乙酸脱羧酶(组分D)中以制备100×草酰乙酸脱羧酶原液。
2.3制备测定混合物:将5mL测定缓冲液(组分C)加入一个酶混合瓶(组分B)中充分混合。 将50μLOAC储备溶液(来自步骤2.2)和25μL200XAmplite Red储备溶液(来自步骤2.1)转移到瓶中并充分混合。
注意1:分析混合物不稳定,及时使用,避免直接暴露在光线下。
注意2:将未使用的200X Amplite Red原液储存在-20℃,避免光照和反复冻融循环。
3.运行草酰乙酸测定:
3.1将50μL测定混合物(来自步骤2.3)添加到草酰乙酸标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(参见步骤1.3),以使总草酰乙酸测定体积为100μL/孔。
注意1:对于384孔板,每孔加入25μL样品,25μLAssay混合液。
注意2:在pH 6.5至7.0下进行草酰乙酸测定。
3.2在室温下孵育反应混合物30分钟至1小时。
3.3使用575 nm的吸光度读板仪检测吸光度的增加。
FluoroQuest 防褪色固定介质 货号20005-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
FluoroQuest 防褪色固定介质(含DAPI)
简要概述
具有DAPI的FluoroQuest 是一种水性固定介质,用于保留组织和细胞涂片的荧光。这种封固剂含有抗褪色剂以降低染料的光漂白速率,并以DAPI强化,DAPI是DNA的复染剂。用于原位杂交技术或需要荧光法进行DNA染色的其他方法。DAPI在360 nm处激发并在460 nm处发射,产生蓝色荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的FluoroQuest 防褪色固定介质。
点击查看光谱
产品说明书
样品实验方案
以下是我们推荐的方案,仅提供指导。具体实验应根据您的特定需求进行修改。
-
预热溶液:从冰箱中取出安装溶液。将瓶子加热至室温,避光。
-
添加溶液:清除样品中多余的液体。向样品中加一滴固定溶液。如果样品在载玻片或组织培养皿上,请小心地将盖玻片放在液滴上,以免产生气泡。如果样品在盖玻片上,请将盖玻片倒在干净的玻璃载玻片上。去除多余的防褪色成分。
-
准备用于成像的样品:固定溶液应孵育2小时至过夜。要长期存放,请用指甲油或塑料密封剂将盖玻片密封在玻片上。已安装的载玻片应在黑暗中于4°C存放,荧光成像将保持稳定数周,样品可以在安装后立即成像。
图示
图1. 甲醛固定,石蜡包埋的人肺腺癌阳性组织的荧光IHC 。用兔抗EpCam抗体对人肺腺癌阳性组织切片进行染色,然后分别与iFluor 488 Styramide (Cat#45020)染色的聚HRP标记的羊抗兔IgG二抗一起孵育。将组织固定在带有DAPI(Cat#20005)的FluoroQuest 抗褪色固定介质中。
Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒 蓝色荧光 货号11100-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒 蓝色荧光
简要概述
Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。荧光胺本质上是非荧光性的,但是一旦与脂肪胺类(包括:多肽、蛋白质)反应便会产生一种带蓝绿色荧光的衍生物。Amplite荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒提供了一种在水溶液中对蛋白质进行定量检测的简单方法。它的荧光信号可以容易读出Ex/Em = 380 /470 nm。该Amplite 荧光胺蛋白质检测法可以便捷地用于96或384微孔板分析中,并且无需任何分步操作就可以容易地实现自动化。本检测法可以在30分钟内完成。用Amplite 荧光胺蛋白质检测试剂盒,可以检出少至3 ug/mL的BSA。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒。
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.准备荧光胺工作溶液(25μL)
2.添加BSA标准品或测试样品(75μL)
3.在室温下孵育5-30分钟
4.在Ex / Em = 380 / 470nm处读取荧光强度
溶液制备
1.1标准溶液
BSA标准
通过进行1:2连续稀释,将适量的BSA标准品1 mg / mL(组分C)稀释到PBS中,以获得BSA标准品(BS7-BS1)的连续稀释液。
2.工作溶液
将DMSO(组分B)的全部内容物加入荧光胺(组分A)的瓶中,并充分混合。 注意:2.5 mL的荧光胺工作溶液足以用于1个平板。
样品分析
表1.实心黑色96孔微孔板中BSA标准品和测试样品的布局。 BS = BSA标准品(BS1-BS7,1.563至100μg/ mL),BL =空白对照,TS =测试样品。
BL | BL | TS | TS |
BS1 | BS1 | … | … |
BS2 | BS2 | … | … |
BS3 | BS3 | ||
BS4 | BS4 | ||
BS5 | BS5 | ||
BS6 | BS6 | ||
BS7 | BS7 |
表2.每个孔的试剂组成
孔 | 容积 | 试剂 |
BS1-BS7 | 75ul | 连续稀释(1.563至100微克/毫升) |
BL | 75ul | PBS |
TS | 75ul | 测试样本 |
1.根据表1和2中提供的布局制备BSA标准品(BS),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用30μL试剂代替75μL。
2.向BSA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入25μL荧光胺工作溶液,使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入10μL荧光胺工作溶液,总体积为40μL/孔。
3.在室温下孵育反应5至30分钟,避光。
4.用Ex / Em = 380 / 470nm的荧光板读数器监测荧光增加。
APC-Cy7串联染料 货号2587-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
ReadiUse 预活化APC-Cy7串联染料
简要概述
产品基本信息
货号:2587
产品名称:ReadiUse 预活化APC-Cy7串联染料
规格:1mg
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:N/A
溶剂:水
激发波长(nm):651
发射波长(nm):780
产品介绍
ReadiUse 预活化APC-Cy7串联染料是美国AAT Bioquest生产的蛋白标记染料,别藻蓝蛋白(APC)是从螺旋藻(一种蓝绿藻)中分离的藻胆蛋白。与其他藻胆蛋白一样,APC是荧光的,具有极高的吸收率和高量子效率。它是一种蛋白质,通过常规蛋白质交联技术可以很容易地与抗体和其他蛋白质连接,而不会改变其光谱特征。 APC-Cy7是流式细胞仪中常用的颜色。其主要吸收峰位于651nm,发射峰位于~780nm。 AAT Bioquest提供这种预活化的APC-Cy7,以促进APC-Cy7串联结合抗体和其他蛋白质,如链霉抗生物素蛋白和其他二级试剂。我们的预活化APC-Cy7串联已准备好结合,产生比常规繁琐的基于SMCC的缀合化学高得多的产率。此外,我们的预活化APC-Cy7串联通过其蛋白质丰富的氨基与蛋白质缀合,而SMCC化学靶向必须通过抗体还原而再生的硫醇基团。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的ReadiUse 预活化APC-Cy7串联染料。